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PH探针染色这4点要注意!

点击次数:  更新时间:2017/12/2 14:37:51  

BCECF AM是最常用的检测细胞内pH的荧光探针。BCECF AM即2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein,acetoxymethyl ester,本BCECF AM (pH荧光探针)是配制于无水DMSO (anhydrous DMSO)中的储存液,浓度为5mM。 BCECF AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。BCECF AM没有荧光,进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成BCECF,从而被滞留在细胞内。BCECF在适当的pH值情况下可以被激发形成绿色荧光。最大激发波长和发射波长因pH的不同而有所不同,最大激发波长大致在503nm左右,最大发射波长大致在520nm左右,实际检测时推荐使用的激发波长为488nm,发射波长为535nm。BCECF AM不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究,也有报道用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等的细胞内pH水平检测。在有细胞内pH变化的细胞毒性、细胞凋亡、细胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中BCECF AM被广泛应用。用于细胞内pH检测时,常用的BCECF AM的浓度为1-10μM。


注意事项:


1、BCECF AM(pH荧光探针, 5mM)可能对人体有害,请注意适当防护。


2、本BCECF AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。


3、荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。


4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。