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质粒DNA高频转化大肠杆菌实验

点击次数：  更新时间：2017/2/27 17:37:50  

实验材料：感受态细胞

试剂、试剂盒： 质粒、DNA、抗生素

仪器、耗材：Ep管、水浴锅、LB平板

实验步骤

1、取新制备的一管感受态细胞。

 

2、取0．03 ml感受态细胞转和4 ng质粒DNA混匀，置冰浴30min

 

3、将 Ep管置于42 ℃水浴中热冲击2分钟，立即置于冰上1分钟。

 

4、在 Ep管中加70 ul LB培养基混匀，37 ℃培养30min

 

5、涂在含适当浓度抗生素的LB平板上。

 

6、37 ℃培养过夜，长出的菌斑既为阳性克隆。