一、细胞操作

2.细胞冻存
   
研究意义:

细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。

操作：

配制冻存液：按照 FBS : DMSO=9:1的比例配制，在显微镜下观察细胞状态良好时，而且细胞的融合度达到90%以上，弃去培养液，用PBS冲洗2遍，加入胰蛋白酶消化3 min，再加入含10 % FBS的DMEM(RPMI-1640)终止消化，离心1000 rpm，3 min，弃上清，加入冻存液，吹打均匀，每管1～1.5 mL细胞悬液，移入冻存管，置于程序降温盒中。