组织样本总蛋白提取(小鼠肝组织)
1、颈椎脱臼处死小鼠,75%乙醇擦拭皮肤,剪开腹腔,剪切肝脏组织。
2、平皿中放入6ml预冷0.9%NaCL。
3、称取0.6g左右肝组织,在平皿中剪碎组织,并转移到匀浆器。
4、预冷裂解液中添加PMSF(20ug/2ml)。
5、取2ml预冷裂解缓冲液,迅速加入匀浆器,冰浴条件下充分研磨。
6、组织研磨液转移至1.5ml离心管。
7、4℃,15000rpm,离心10min。
8、取上清组织蛋白粗提取液至新的1.5ml离心管。
9、进行蛋白定量,-80℃保存。