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细胞中酸性磷酸酶的定位2

点击次数：  更新时间：2018/4/4 9:46:51  

实验方法与步骤：

1 取20g左右小白鼠一只，每日向其腹腔注射6%淀粉肉汤1ml，连续3d。

2 在第三次注射后4和，向腹腔注射生理盐水1ml。

3 颈椎脱臼法处死小鼠后，打开腹腔，用注射器（不装针头）直接吸取腹腔液。

4 向预冷的盖玻片上滴一滴腹腔液，立即用牙签图后放入小培养皿4℃冰箱中30min，使细胞自行铺展开。

5 冷风吹干玻片。

6 多聚甲醛固定30min。

7 PBS冲洗。

8 向盖玻片上滴加酸性磷酸酶工作液，37℃，30min。

9 蒸馏水洗净，吸去多余水分。

10 放入2%硫化铵溶液中处理5min，蒸馏水洗净。

11 封片

12 镜检。

13 对照实验：将腹腔涂片置50℃温育30min使酶灭活，再进行6-12步同样的实验。