二、实验原理
3. 小鼠的处死:
(1) 脊椎脱臼法
右手抓住小鼠用力向后拉,同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头,将脊髓与脑髓拉断,鼠便立即死亡;如左手拇指与食指放在脊椎第三四节处,鼠下肢瘫痪。
(2) 断头法
用左手食指和拇指用力按住小鼠鼠头并将小鼠尾巴缠绕在左手无名指和食指间,用力使小鼠无法动弹,此时小鼠颈部出现勒痕,按此勒痕果断将小鼠头部剪掉。若实验需取血,可在此时用吸管快速将血液转移至容器中。
4. 小鼠的解剖实验:
(1) 先解剖已处死小鼠的头部,取出完整的脑部;
(2) 用镊子夹住小鼠肚皮上的皮毛,用剪刀剪去皮毛下的腹膜,此时可以看到小鼠腹部的脏器,依次完整的取出肝、胆、脾、肾;
(3) 剪开胸腔与腹腔之间的隔膜,完整的取出胸腔中的肺和心脏;
(4) 最后取出大腿骨,并在大腿上取一块与心脏大小差不多的肌肉。
三、实验仪器与试剂
主要仪器:放射性活度计, FW-2000锝分析仪,天平,1 ml一次性注射器,解剖 工具,毛细管,聚酰胺薄片,烧杯等。
主要试剂:Na99mTcO4淋洗液,生理盐水,乙腈,MDP药盒等。
四、实验步骤
将2ml生理盐水注入MIBI药盒,振荡使充分溶解。加入0.3ml约1.1mCi新鲜淋洗的 99mTcO4-溶液,振荡使混合均匀,室温静置15min。以生理盐水-聚酰胺薄膜体系检测标记率。用生理盐水将药物99mTc-MIBI稀释至约200μCi/ml。 取6只约18-20g的昆明小白鼠,尾静脉注射0.1ml(约25μCi)的 99m Tc-MIBI (放射化学纯度大于90%),分别在注射后5、30、和60 min将小鼠断头处死,取出心、肝、肺和血等组织,称重并用锝分析仪测其放射性计数,计算每克组织的放射性摄取率 XID/g=[(A组织/A注)×100%]/m组织
五、实验结果
本次实验,由于操作不熟练,无法及时有效的完成实验内容,因而我们没有得到实验有效数据,只是进行了抓取固定方法、小鼠静脉注射、处死及解剖的练习。
六、问题讨论
1. 在做动物体内生物分布实验时需要特别注意哪些事项?
答:需要注意的事项有: 1)注射时应排尽注射器内的气泡; 2)如需反复注射,应尽可能从末端开始,以后向尾根部方向移动注射; 3)注射完毕后,应先用棉花堵住伤口,再拔针,以免药液漏出; 4)取血时,应避免取到尿液。取一次血,换一个滴管; 5)血液应尽快称重,以免其挥发后引入误差; 6)解剖完一个器官后或组织后,应擦拭镊子等器具,以防止上面的残留物 影响其他数据。