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D-Hanks液和胰蛋白酶消化液的配制

点击次数：  更新时间：2018/7/25 14:51:21  

D-Hanks液的配制

1. Hanks和D-Hanks液的成分比较。

2. 依次加入药品至800mL蒸馏水中，溶解后定容至1000mL。分装成100mL/瓶，其中1瓶加入终浓度0.02%和DETA,准备配制胰蛋白酶。

3. 高压灭菌，10MPa,10min。

 

胰蛋白酶消化液的配制

1. 在D-Hanks液高压灭菌之后，晾至室温，4℃保存备用。

2. 称取一定量胰蛋白酶粉末于研磨器中（夏天时研磨器应放在冰浴中），加入少量D-Hanks液碾磨100~1000次，调制成糊状。再放入4℃预冷的适量D-Hanks液中，4℃下磁力搅拌使完全溶解（一般4~12h）。

3. 用NaHCO₃干粉将胰酶溶液的pH调至8.0左右（胰酶作用的最适pH为8.2）。

4. 过滤除菌（方法见前篇培养基的配制），—20℃保存。