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非酒精性肝炎大鼠标准操作

点击次数：  更新时间：2022/6/16 14:57:00  

模型简介：慢性非酒精性脂肪肝炎是一种代谢紊乱症，伴随着不同程度的炎症和纤维化，最终将演变成终末期肝病（如肝硬化，肝癌），与此同时与心血管疾病，门脉高压症，二型糖尿病和严重肾病的高风险因素之一密切相关。NASH主要病理特征为肝细胞大泡性脂肪变伴肝细胞损伤和验证，严重者可发展为肝硬化。1.实验动物：成年大鼠（200-250g），雌雄各半，18只

2.实验材料：高脂饲料，四氯化碳（分析纯），大豆油（试剂级）。

3.规程：

3.1试剂配制：40%四氯化碳豆油溶液：按2:3=四氯化碳：豆油混合两种试剂，常温保存。

3.2动物处理

正常组喂养普通饲料，自由摄食饮水；HFD4w+2wCCl4组大鼠接受4周高脂饮食，于第3周开始接受每周2次40%四氯化碳豆油溶液皮下注射，通常在周二和周五进行，注射剂量为0.2ml/100g体重。

3.3注意事项：

3.3.1高脂饲料订购注意量，一开始要不要太保守，需订购1个月以上量。

3.3.2高脂饲喂不能间断，一旦间断大鼠体重可能不会增长甚至负增长。

3.3.3大鼠在注射四氯化碳后，体重增长也会变缓。

3.4成功标准：

于最后一次注射后第三天取大鼠肝脏进行一般观察，取肝右小叶距尖端1cm处取2cm3组织石蜡包埋，切片行HE染色，观察肝细胞脂肪变形情况和肝纤维化情况

大泡性脂变显著，呈弥漫或散在分布，小叶内炎症轻微，门管区炎症重于小叶内炎症，少见气球样变性，门管区及其周围纤维化明显，可形成间隔分隔肝实质。

虽然正常组肝细胞存在损伤，但结构尚完整，可见肝板结构，门管区未见炎症浸润。模型组肝实质结构受损严重，明显可见空泡性脂肪变性，门管区炎症细胞浸润，且有不同程度出血现象，伴有纤维化。由此可见，该次模型验证结果成功。

空泡性脂肪变性明显，有出血现象，个别样本纤维化严重，造模成功。