OVA致哮喘小鼠模型标准操作
点击次数： 更新时间：2022/7/9 11:39:06
模型简介：过敏性哮喘（bronchial asthma，哮喘）是由多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的慢性气道炎症，在易感者中此种炎症可引起反复发作的喘息、气促、胸闷和（或）咳嗽等症状，多在夜间和（或）凌晨发生，气道对多种刺激因子反应性增高。但症状可自行或经治疗缓解。
1.实验动物：SPF级Balb/c小鼠，雌性，7-8周龄；
2.实验材料：卵白蛋白（sigma）；氢氧化铝佐剂（Thermo）；磷酸缓冲盐溶液（PBS）；生理盐水；10μL / 100μL / 1mL移液枪；胰岛素注射器；分析天平；
3.规程：
3.1试剂配制：
3.1.1致敏剂配制：称取0.018g卵白蛋白溶于6ml磷酸缓冲盐溶液中，配制成浓度为3mg/ml的卵白蛋白溶液；取70μL的3 mg / mL的卵白蛋白溶液，加入2.03 mL 磷酸缓冲盐溶液中，配制成0.1mg/ mL的卵白蛋白溶液2.1mL，再加入等量（2.1mL）氢氧化铝佐剂，配制成0.05mg/mL的致敏剂，现配现用；
3.2.2激发剂配制：称取0.204mg卵白蛋白溶于4.08ml生理盐水中，配制成5%卵白蛋白溶液，现配现用；
3.2 模型建立：
3.2.1致敏：动物适应性饲养7天之后，第0、7、14、21天，腹腔注射200μL 致敏剂进行致敏；
3.2.2激发：第28-32天，经鼻滴注激发剂50μL /只/D；
3.3检测：末次激发完成后24h（第33天），收集肺泡灌洗液（BALF），肺组织，血清进行病理检测：
1.肺组织病理检测，HE染色，炎症评估（病理实验）
4.模型验证结果
研发OVA哮喘模型结果：正常组2，3号可见少量炎症细胞浸润，且肺泡破裂融合 ，1号较正常，肺泡无肿胀；模型组可见明显炎症细胞浸润，肺泡壁增厚，间隔增宽，肺泡扩张，造模有效。
5.实验细节
5.1由于致敏次数较多（共4次），可根据动物的状态，适量增减致敏剂的单次注射量，以保证动物的存活率，减少动物死亡，降低死亡率；
5.2在滴鼻激发的阶段，为了保证能顺利激发，应使用10μL的移液枪，少量多次进行激发，即单次10μL激发剂激发，等动物完全吸入之后再进行10μL激发剂滴鼻激发，直至滴鼻50μL。
