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细菌的耐药性变异—— R 因子传递实验

点击次数：  更新时间：2016/10/24 14:17:30  

 

细菌的耐药性变异—— R 因子传递实验

 

有些细菌携带接合性R 质粒，并能通过接合将耐药性传递给原来敏感的细菌，使其迅速转为耐药菌。耐药性质粒除了在同种细菌中作水平传递外，还可以在异种细菌之间传递，因而使对抗生素的耐药菌株不断增多，造成防治上很大的困难。

 

实验方法原理:

应用具有链霉素R 因子的大肠杆菌作为供体菌，对链霉素敏感的痢疾杆菌作为受体菌。经共同孵育后，由于供体菌与受体菌间的接合，供体菌的链霉素R 因子转移给受体菌，而使痢疾杆菌获得耐链霉素的特性，因此能在含链霉素的S-S平板上生长。由于痢疾杆菌不分解乳糖而呈无色半透明菌落。大肠杆菌能分解乳糖产酸，在S-S 平板上使指示剂（中性红）显色，故为粉红色不透明的菌落。

实验步骤

1.  将耐链霉素的大肠杆菌与链霉素敏感的大肠杆菌和弗氏痢疾杆菌分别接种于肉汤培养基中，37 ℃培养10～12 小时。

 

2.  将耐链霉素的大肠杆菌与链霉素敏感的弗氏痢疾杆菌肉汤培养物按 l：4混合于一支无菌试管内，置37 ℃1小时。

 

3.  用接种环沾取上述混合液划线接种于含100 ug/ml 链霉素的S-S （或中国兰）平板上（S-S及中国兰平板的制备法见实验九肠道杆菌）置37 ℃温箱培养18～24 小时。

 

4.  另取对链霉素敏感的大肠杆菌和弗氏痢疾杆菌按上法混合。37 ℃1 小时，接种S-S平板及含链霉素的S-S平板上，37  ℃培养18～24 小时。

 

5.  观察上述细菌在S-S （或中国兰）平板及含链霉素的S-S 平板上的生长情况。