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SUMO质粒瞬时转染

点击次数:  更新时间:2016/10/27 15:16:27  

SUMO质粒瞬时转染


(1) 将生长状态良好的细胞接种于直径4-6cm的培养皿中,5% CO2,37℃培养箱内培养16-24h,细胞融合至60%-90%时可进行转染。


(2) 转染前1h将细胞培养液换成不含抗生素的培养液。


(3) 用Opti-EME培养液稀释4倍的Lipo2000试剂。


(4) 用Opti-EME培养液稀释SUMO质粒。


(5) 将上两步溶液按1:1比例混合配成转染复合液,室温,孵育20min。


(6) 将已接种细胞的培养皿中加入200ul转染复合液,充分混匀。


(7) 继续培养4-6h,更换正常培养液。


(8) 培养24-72h,镜下观察和检测带有荧光标记的SUMO质粒的表达。