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HE染色技术几种常见的染色问题

点击次数：  更新时间：2017/12/14 16:37:28  

1.脱蜡方面：

切片中白色的区域脱蜡不彻底，染色液由于石蜡斑点的残留而不能渗透着色。

原因：①烤( 烘) 片温度太低，脱蜡前没有充分烤( 烘) 干。 ②二甲苯脱蜡时间不足， 或二甲苯使用过久，造成脱蜡不尽。

对策：①用无水乙醇去掉玻璃片上的水分，重新二甲苯脱去石蜡。 ②切片需退回到脱蜡步骤，延长脱蜡时间，或更换二甲苯，脱色、漂白、重新染色。

2.染色：

（1）苏木素染色方面

A.苏木素染色太浅，细胞核与细胞质颜色对比度差。

原因：染色时间短；苏木素过度氧化，失去染色能力；分化时间过长。

对策：切片重新染色。

B.细胞核过染， 核膜、核仁等不清晰， 细胞质( 尤其是皮肤上皮细胞) 含有大量的细胞核染色液苏木精， 导致细胞核与细胞质比例失调。

原因：染色液时间过长、切片太厚、分化步骤时间太短。

对策：如果切片不是因为太厚，那么就因该脱色、重新染色， 对于染色和分化时间做些适当的调整。若太厚则需要重新切片。

C.切片细胞核染后呈棕色，这表明苏木精没有充分蓝化， 或苏木精过度氧化失去染色能力

原因：苏木精染色液过度氧化和切片在苏木精染液染色后返蓝不足。

对策：染色前检查苏木精染色液的染色能力，过渡氧化，应及时更换。其次，在苏木精染色后， 给切片以足够的蓝化时间。

 

 

D.染色后有杂质

 

原因：苏木精染色液中的金属膜黏附在玻片上。

对策：每天染色前仔细过滤苏木精染色液，或建议使用半氧化苏木精染色液。