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细胞培养注意事项

点击次数：  更新时间：2017/3/7 18:21:07  

细胞培养注意事项

 

a.实验进行前，先摆好操作台，开启操作台及无菌室紫外灯灭菌30-60min;

b.灭菌后关闭无菌室、操作台紫外，并开启日光灯15-20min后打开操作台和无菌室加装滤网的通风系统5-10min以降低臭氧浓度（减少对操作人员的伤害），开始实验。

c. 实验人员必须穿好实验服，戴好口罩及手套后方可进入实验室。这一方面可以减少无菌室的污染，一方面可以保护实验员的安全。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台，并且操作期间切不可弄伤手部及接触感染源的皮肤。

d.实验操作前用75%酒精擦拭工作区域，并应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作,在酒精灯附近操作。

e.实验时避免经过培养皿或试剂瓶上空，小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口。

g.为防止交叉污染，细胞培养液（DMEM、RPMI-1640等）应分装标记使用。一种细胞使用对应瓶分装的培养基。

h.培养基使用前调整温度至37℃。

i.Trypsin、FBS、NBS应分装使用，避免反复冻融。

j.经常检查细胞培养箱内的CO2的浓度、温度、湿度等，查看CO2 钢瓶的内外压力表，定期检查操作台及无菌室的通风过滤系统、紫外杀菌灯等，并注意维护，定期更换。