蛋白组学 您的位置：首页 > 实验服务 蛋白组学

常规操作蛋白质沉淀分离

点击次数：  更新时间：2017/4/28 15:40:35  

首先我们要在清洗和洗脱阶段时，充分的重悬蛋白质沉淀是非常重要的。虽然沉淀看起来十分结实, 但是仍然会有大量的上清液会陷在里面，而且会附在离心管的管壁上。会和之前所提到的一样，我们应该尽量干燥沉淀物这样可以除去里面存在的上清液。如果沉淀比上清液的量大，建议采用10倍体积的适宜缓冲液来进行重悬，这样可以去除陷入在沉淀物中的上清液蛋白质。像这个清洗 PEI 沉淀呢是一个非常有用的步骤哦,一般推荐采用与TissueTearor类似的匀浆器，这样可以将沉淀打碎并且形成均匀的悬浮液。如果重悬不够充分的话, 那么我们清洗的步骤会起不到任何有效去除核酸的效果，而且分离的作用也会相应的降低。

最后我们在混合时应该避免泡沫的形成。若是有空气混入到蛋白质溶液中它会促进蛋白质的氧化，同时在空气中以及水界面也会引起蛋白质的变性。