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培养基简介

点击次数：  更新时间：2018/6/2 14:06:45  

培养基简介 

背景资料:

    早期细胞培养多使用天然培养基，主要是生物体的各种体液，如血浆、血清、淋巴液、组织或胚胎提取液等。其优点是容易得到，营养价值高；缺点是成分不易控制。目前使用的是化学成分明确的合成培养基。合成培养基是模拟细胞和组织生长所需要的营养成分而设计的化学成分明确的培养基，目前广泛使用。但目前多数情况下合成培养基还不能彻底替代天然培养基，两者赏配合使用。组织培养使用的培养基一般是由合成培养基和小牛血清配制而成。

合成培养基有商品出售，它是根据细胞生长的需要按一定配方制成的粉状物质。其主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子和其他辅助物质。用它配制成的培养液的酸碱度和渗透压与活体内细胞外相似。动物细胞的培养大多数是需要轻微的碱性条件，pH为7.2~7.4；而植物细胞大多数需要酸性条件。NaHCO₃用来调节pH。

 

培养基成分分析：

培养基含有细胞生长所需的各种营养成分，包括氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子和其他辅助物质。

①氨基酸：合成培养基通常不含有全部合成蛋白质所需的氨基酸，只含有必需氨基酸和较难合成的氨基酸，谷氨酰胺除用于蛋白质合成外还具有特殊的作用。它能促进各种氨基酸进入细胞膜，是核酸合成的氮源，还参与ATP的合成。

②维生素：多数合成培养基添加生物素、叶酸、烟酰胺、泛酸、吡哆醇、核黄素、硫胺素及B₁₂等水溶性维生素，脂溶性维生素可从血清中得到补充。

③无机盐：细胞生长需要Na⁺、K⁺、Ca²⁺、Mg²⁺、N和P等基本元素及碳酸氢盐、磷酸氢盐，还需要铁、铜和锌等微量元素。这对维持细胞渗透压，维持酶的活性，调节溶液的酸碱度等方面起着重要的作用。

④碳水化合物：是细胞生命活动的主要能量来源，主要添加D-葡萄糖，也有添加D-干露糖和D-果糖等。

⑤血清：普通的细胞培养需要在合成培养基中添加一定量的血清才能使细胞增殖，原因是血清中含有细胞生长因子；血清还提供一些酶、维生素、微量元素和激素等；血清能中和如重金属等有毒物质的毒性，对细胞起到保护作用；血清可抑制胰蛋白酶的活性；血清可提供接触和伸展因子，增加细胞对瓶皿的贴附性。用于细胞培养的血清常用牛血清。一般动物越年轻，其血清越有利于细胞生长，故成年牛血清不如小牛血清好，小牛血清不如胎牛血清好。

⑥其他成分：包括肌醇、胆碱、胆固醇、酸碱指示剂（如酚红）、丙酮酸钠等。