实验服务

免疫学 您的位置:首页 > 实验服务 免疫学

中性粒细胞吞噬功能的测定

点击次数:  更新时间:2018/8/11 10:48:05  

中性粒细胞(polymorphonuclear leukocyte,PMN)的功能包括粘附、移动、吞噬杀菌等,是机体天然免疫力的重要组成部分。

试剂及材料

1. 白色葡萄球菌

2. 肉汤培养基

3. 硷性美蓝液

操作方法

1. 菌液的制备  将白色葡萄球菌接种于中,放37℃温箱内培养12h左右;置水浴中加热100℃ 10min杀死细菌,用无菌生理盐水稀释成6×108 细菌/ml备用;

2. 用血红蛋白吸管吸取受试者耳垂或指血40μl,立即加入盛有20μl肝素(浓度为20U/ml)的洁净凹玻片的凹孔内,轻轻搅动混匀, 再加上述葡萄球菌菌液20μl充分混匀。然后置入铺有湿纱布的有盖容器内(此容器先放37℃温箱中预温),在37℃温箱中作用30min,其间每隔10min摇匀一次;

3. 作用完毕,取1小滴混合液置于洁净无油污的载玻片一端,推成薄片。待干后,用甲醇固定4~5min,硷性美蓝液染2~3min,置油镜下观察。随机计数100个中性粒细胞,分别记录发生吞噬和未吞噬的白细胞数,对有吞噬作用的白细胞,应同时记录所吞噬的细菌数;

结果分析

吞噬细胞%=即100个中性粒细胞中吞噬有细菌的细胞数;

吞噬指数=将100个中性粒细胞所吞噬的细菌总数除以100,得到每个白细胞吞噬细菌的平均数,即为吞噬指数。

本文转载自丁香通