关于病毒培养实验,由于病毒必须在易感的活细胞内才能增殖,因此,根据不同病毒选择敏感动物,离体组织细胞和鸡胚进行分离培养。
实验方法原理:
注意选择动物种类,年龄。按病毒侵袭部位的不同,选择适宜的接种途径,例如脑炎病毒以注射脑内最敏感。接种后经一定潜伏期,动物发病或死亡即进行解剖。根据动物的症状表现,器官病理改变,受染脏器组织悬液能在同种动物进行连续传代,并排除其他微生物污染的可能性等,即可证明有病毒的增殖。
实验材料:
小白鼠
实验步骤:
1.以无菌0.25 毫升注射器抽取脑炎病毒悬液0.1 毫升,去除注射器内的气泡。
2.取出小白鼠,左手将小白鼠固定,固定时用大拇指和食指握住小白鼠的头部,左手手掌轻轻按住小白鼠的体部,使其俯卧在桌面上右手以灭菌棉签蘸以碘酒,消毒小白鼠的右侧颞部皮毛。
3.右手拿注射器在小白鼠颞部(眼与耳根连线的中点略偏耳朵的方向)剌入,进入颅腔进针2~3 毫米,不要插得太深,注射量为0.02~0.03 毫升(不可超过0.05 ml)。
4.注射完毕,将用过的注射器放入煮针锅内煮沸消毒。动物一般在3~4 天后开始发病,食欲减退,活动迟钝,毛耸,振颤,慢慢发展为麻痹,瘫痪死亡。
另外需要注意的是本法适用于一些脑炎病毒的分离培养之用。